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AAV在眼部注射方法有哪些

肺部注射包括鼻内滴注法和气管插管术。鼻内滴注法操作简单，直接将病毒悬液滴入鼻腔，但颗粒可能沉积在上呼吸道，需要较大剂量的病毒。气管插管术能将病毒载体直接输入肺部，避免上呼吸道损失，但需特殊设备和技巧。此外，还有气管内注射，操作与鼻内滴注法类似，但直接注入气管。

然而，基于AAV载体的眼病基因治疗通常需要视网膜下腔注射，这需要经验丰富的专家进行，增加视网膜脱离的风险。AAV横向扩散能力有限，只能感染注射中心附近的一部分视网膜细胞。玻璃体腔注射能避免这些问题，是一种常用、安全、操作简单的递送方式。

麻醉小鼠，确保其对疼痛刺激无反应。2） 保护小鼠眼睛，保持湿润并抑制眨眼反射。3） 保持小鼠体温，防止麻醉后过低。4） 清洁小鼠耳朵，并消毒。5） 打开鼓室大疱，暴露镫骨动脉和圆窗膜。6） 轻轻在圆窗膜中心穿刺，观察液体流出。7） 将0.6~2μL的AAV载体注射至耳蜗鼓阶。

AAV因其特异性而成为首选载体，不同血清型针对特定组织有较高感染能力，通过合适注射方法可实现体内特异性表达。实现特异性表达的方法包括选择组织特异性血清型、使用细胞特异性启动子以及局部注射等。

如hSyn启动子常用于神经元特异性表达，Mecp2启动子则在神经元中优先表达。最后，AAV的注射方式包括脑立体定位、脑室注射等，这些方法能够实现基因在特定神经区域的精确表达。以脑立体定位为例，如图9所示，通过AAV9结合CamKIIα特异性启动子在小鼠海马区进行注射，可以实现基因在兴奋性神经元的特异性表达。

值得注意的是，常见的消毒剂如乙醇、乙醚和氯仿对AAV病毒无效，因此使用酒精消毒并不能有效地清除病毒。更推荐使用清水清洗、高压消毒、强氧化性消毒液（如巴斯消毒液）或强碱性液体浸泡等方法，以确保有效消除病毒污染。